• iPSC-PKP2-KO细胞模型建立

使用CRISPR/Cas9基因敲除技术，在iPS细胞上2号外显子开始敲除了91bp片段，引发了移码突变，从而构建PKP2 KO模型。

• 应用案例

2013年，Sanford-Burnham医学研究所的研究团队在《Nature》期刊上发表文章，利用患有致心律失常性右心室发育不良/心肌病（ARVD/C）和PKP 2突变的患者的成纤维细胞构建出了ARVD/C-iPSC体外疾病模型。该模型显示突变PKP 2 iPSC-CM中过度的脂肪生成和凋亡。具有纯合PKP 2突变的iPSC-CM也具有钙处理缺陷。证明了患者特异性iPSC在模拟成人发作的心脏病（例如ARVD/C）方面的效用，并强调了PKP2突变在该疾病发病机制中的作用。这些发现有助于更好地了解疾病机制，并为治疗干预措施提供了潜在的靶标。

参考文献：Kim C, Wong J, Wen J, Wang S, Wang C, Spiering S, Kan NG, Forcales S, Puri PL, Leone TC, Marine JE, Calkins H, Kelly DP, Judge DP, Chen HS. Studying arrhythmogenic right ventricular dysplasia with patient-specific iPSCs. Nature. 2013 Feb 7;494(7435):105-10. doi: 10.1038/nature11799. Epub 2013 Jan 27. PMID: 23354045; PMCID: PMC3753229.

2013年，新加坡国立大学研究团队在《欧洲心脏杂志》期刊上发表文章，研究人员从一名临床诊断为ARVC的患者身上获得了真皮成纤维细胞，并使用逆转录病毒重编程生成了iPSC系，构建出了ARVD/C-iPSC体外疾病模型。他们发现，与对照组心肌细胞相比，源自arvc-iPSC的心肌细胞表现出桥粒体蛋白的基因表达和免疫荧光信号降低，并且具有更高的脂肪生成表型。透射电子显微镜还揭示了ARVC和对照心肌细胞之间脂滴的差异。该细胞模型概述分析 ARVC 的病理特征 。患者特异性iPSC衍生的心肌细胞可为ARVC的发病机制提供新的见解，并评估疾病改善治疗策略的有效性 。

参考文献：Ma D, Wei H, Lu J, Ho S, Zhang G, Sun X, Oh Y, Tan SH, Ng ML, Shim W, Wong P, Liew R. Generation of patient-specific induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes as a cellular model of arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy. Eur Heart J. 2013 Apr;34(15):1122-33. doi: 10.1093/eurheartj/ehs226. Epub 2012 Jul 13. PMID: 22798562.